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清華施一公院士頒發(fā)最新PNAS文章

2015-05-16 18:06  來源:http://m.elinglong.com/  閱讀:

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清華施一公院士頒發(fā)最新PNAS文章

起源:生物通 2014-8-20 何嬙

  來自清華大學(xué)的研究人員在新研究中解析了,轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白AdiC 介導(dǎo)pH依賴性底物轉(zhuǎn)運(yùn)的分子機(jī)制。相干論文“Molecular mechanism of pH-dependent substrate transport by an arginine-agmatine antiporter”揭曉在8月18日的《美國國度迷信院院刊》(PNAS)上。

  清華大學(xué)的施一公(Yigong Shi)教學(xué)是這篇論文的通信作者。施一公研究組重要努力于應(yīng)用結(jié)構(gòu)生物學(xué)和生物化學(xué)的手腕研究腫瘤產(chǎn)生和細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制,會(huì)合于腫瘤克制因子和細(xì)胞凋亡調(diào)理蛋白的結(jié)構(gòu)和功能研究、嚴(yán)重疾病相關(guān)膜蛋白的結(jié)構(gòu)與功能的研究、胞內(nèi)生物大分子機(jī)械的結(jié)構(gòu)與功效研究。返國后這6年里,施一公在Nature等國際頂級(jí)期刊上揭橥了多篇論文,同時(shí)他也搭建起了以清華大學(xué)為核心的人材引入橋梁。客歲入選為中科院院士。

  諸如大腸桿菌、沙門氏菌和鼠疫桿菌一類的腸致病菌,都是依附于龐雜的耐酸性體系(acid-resistance systems,ARs)在胃極其酸性的情況中保存。在三種已知的ARs中,AR2跟AR3的份子機(jī)制獲得了更深刻地剖析。在年夜腸桿菌中,AR2和AR3各自應(yīng)用兩個(gè)分子元件:一個(gè)嵌入膜中的氨基酸反向轉(zhuǎn)運(yùn)卵白(antiporter)和一個(gè)胞質(zhì)脫羧酶來排擠細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)子。

  AR3包含有一個(gè)氨基酸反向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白AdiC,擔(dān)任胞外L-精氨酸(Arg)與胞內(nèi)胍基丁胺(Agm)的交流。一個(gè)精氨酸脫羧酶AdiA,經(jīng)由過程移除Argα-羧酸基團(tuán)上的一個(gè)二氧化碳分子將Arg轉(zhuǎn)換為Agm。與AR3類似,AR2包括有一個(gè)反向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GadC,擔(dān)任細(xì)胞外L-谷氨酸(Glu)與細(xì)胞內(nèi)γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid ,GABA)的交換。兩個(gè)Glu脫羧酶GadA和GadB將Glu改變?yōu)镚ABA。AR2或AR3每次轉(zhuǎn)運(yùn)和脫羧輪回都可以將細(xì)胞質(zhì)中的一個(gè)質(zhì)子排出至細(xì)胞外環(huán)境中,由此進(jìn)步細(xì)胞內(nèi)pH,增進(jìn)細(xì)菌在酸性環(huán)境下存活。

  氨基酸反向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白AdiC或GadC的轉(zhuǎn)運(yùn)活性都嚴(yán)格地依賴于pH值。兩種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白都只在pH值6.0或以下時(shí)顯示壯大的轉(zhuǎn)運(yùn)活性。在中性或更高的pH值下,AdiC或GadC均不明顯的轉(zhuǎn)運(yùn)活性。只管以后研究人員已取得了一些對(duì)于AdiC的結(jié)構(gòu)信息,對(duì)AdiC感知酸性pH的分子機(jī)制卻仍不完整明白。

  在這篇文章中,研討職員借助于丙氨酸掃描誘變(alanine-scanning mutagenesis)和體外基于蛋白脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)運(yùn)剖析技巧,斷定了Tyr74是AdiC中一個(gè)相當(dāng)主要的pH感到器。他們證明AdiC變異體體Y74A在一切檢測(cè)的pH值上均表現(xiàn)強(qiáng)盛的轉(zhuǎn)運(yùn)活性,并維持了對(duì)Arg:Agm嚴(yán)厲的底物特異性。用苯丙氨酸(Phe)而非其余的氨基酸來替換Tyr74,能夠保持pH依賴性的底物轉(zhuǎn)運(yùn)。

  聯(lián)合這些觀察成果與構(gòu)造信念,研究人員肯定了pH引誘AdiC激活的運(yùn)作模子:質(zhì)子之間的陽離子&ndash,企業(yè)內(nèi)訓(xùn);π彼此感化以及Tyr74的芬芳族側(cè)鏈攻破了AdiC關(guān)閉的構(gòu)象,使得AdiC可能感知pH值。辨別出這一pH感應(yīng)器和pH感應(yīng)機(jī)制將推進(jìn)懂得細(xì)菌的pH依賴性耐酸機(jī)制。


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